流動注射法的前沿應用（二）
1.引言
流動注射分析(FlowInjectionAnalysis，FIA)，是由丹麥技術大學的J.Ruzicka和E.H.Hansen于1975年提出了的新概念，即在熱力學非平衡條件下，在液流中重現地處理試樣或試劑區帶的定量流動分析技術。它是近20年來才出現的一項分析技術，它與其它分析技術相結合極大地推動了自動化分析和儀器的發展，成為一門新型的微量、高速和自動化的分析技術。流動注射分析發展迅速，它已被廣泛應用于很多分析領域。
應用領域有：水質檢測、土壤樣品分析、農業和環境監測、科研與教學、發酵過程監測、藥物研究、禁藥檢測、血液分析、食品和飲料、分光光度分析等。
2.流動注射-循環催化法同時測定過氧化物酶活性和抗壞血酸濃度
在所有動植物細胞中抗壞血酸(AsA)和過氧化物酶(POD)共存，它們發揮著重要的生理作用。生物體內的AsA可消除自由基和活性氧，同時也是酶的輔助因子；人類需要攝入足量的AsA來維持身體健康。POD對H2O2參與的各種氧化反應有催化作用，它也參與機體中的各種生命活動。因此，如果能同時準確測定POD活性(EPOD)和抗壞血酸濃度(cAsA)即可直接得到生物機體的健康信息。
利用一種流動注射-循環催化光度系統評價抗壞血酸(AsA)干擾過氧化物酶(POD)的催化反應機制時發現，AsA會導致POD催化的顯色產物褪色，使顯色反應體系出現一種無響應的延滯期，當AsA消耗完后POD的催化動力學曲線線性響應區斜率及截距分別與POD活性和AsA濃度相關。基于此現象，建立了一種同時測定POD活性和AsA濃度的新方法。在優化測定條件下，方法成功用于多種蘿卜中POD活性和AsA濃度的測定。方法的線性范圍分別是50~2000U/LPOD和20~350mg/LAsA，相對標準偏差小于1.4%。[1]
3.油浴蒸餾–流動注射分光光度法測定中高鹽水中揮發酚
水中的揮發酚為原生質毒，屬于高毒物質，人體攝入一定量后可出現急性中毒，快速而準確測定水中揮發酚對人類健康和環境保護意義重大。目前水質揮發酚的測定主要有分光光度法、流動注射分光光度法及色譜法。分光光度法儀器簡單，操作容易，應用范圍廣，基層實驗室普及率高，然而該方法操作步驟冗長、繁瑣，精密度、準確度均不高，需要對水樣進行蒸餾萃取，費時費力，萃取試劑三氯甲烷對分析人員身體具有潛在的危害。由于揮發酚成分復雜，色譜法難以實現揮發酚總量的測定，且設備成本高，普及率較低。流動注射分光光度法可在線、快速、密閉、自動完成樣品溶液的處理，分析快速，操作簡便，適合批量樣品的測定，與傳統分光光度法比較，不需要蒸餾和萃取樣品，省時省力，儀器成本適中。但是流動注射法存在蒸餾不完全、出現假陽性結果導致的檢測值偏高現象，因此研究方法的改進很有必要。
建立流動注射分光光度法測定中高鹽水中的揮發酚。用流動注射分光光度法測定中高鹽水中揮發酚時存在嚴重的基體干擾，在線蒸餾的流路長導致加熱模塊受熱不均勻，基體干擾物質去除不理想。蒸餾過程中產生大量的二氧化碳和氯化氫氣體在封閉的管路中無法釋放到外界與蒸餾試劑磷酸反應，導致鐵氰化鉀緩沖溶液的pH值降低，及高溫蒸餾過程中鈣鎂金屬離子穿透水汽滲透膜導致檢測結果的假陽性，雙重干擾致使該方法的使用受到嚴重制約。采用油浴蒸餾測定餾出液中的揮發酚，質量濃度在0.002~0.250mg/L范圍內線性關系良好，相關系數為0.9998，樣品的加標回收率為91.0%~117.0%，相對標準偏差小于3%(n=7)，方法的檢出限為0.001mg/L。該方法可有效消除中高鹽飲用水中揮發酚測定時的基體干擾。[2]
[1]王奔,李永生,高秀峰.流動注射-循環催化法同時測定過氧化物酶活性和抗壞血酸濃度[J/OL].分析試驗室:1-10[2022-08-04].DOI:10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2022.021702.
[2]李龍飛,于聰靈,李永立,朱永曉,張墨,宋凡.油浴蒸餾–流動注射分光光度法測定中高鹽水中揮發酚[J].化學分析計量,2022,31(01):54-57.
